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关于我们

公司简介 
科晓仪器公司是一家专门从事研究、开发、生产、代理销售气相色谱仪、液相色谱仪、数据处理机、色谱工作站、色谱专用气源及色谱专用零配件、易耗品的高科技型企业。公司拥有一批长期从事色谱仪开发及分析应用维修的经验丰富的工程师,在色谱及光谱类仪器的维护、维修、和调试等方面的技术力量雄厚。
企业文化 
以质量求生存、以服务求发展

日历

合作伙伴

上海精密科学仪器有限公司 
浙江大学智达信息工程有限公司 
N2000工作站
上海博迅 
蒸馏水器系列,高压蒸汽灭菌器系列,水温箱系列,高温电阻炉系列,各样培养箱系列,干燥箱系列,净化工作台系列,生物安全柜系列
上海伍丰科学仪器有限公司 
伍丰仪器是一家集研究、开发,生产分析仪器的高科技企业。公司目前主要产品有液相色谱系统、气相色谱仪以及其它相关产品。
兰州中科凯迪化工新技术有限公司 
本中心是继Chrompack公司、J&W公司和Hp公司之后,在世界上第四个拥有和掌握了高难度的高效PLOT柱(多孔层开管柱)制造技术,其中所研制的A12O3/S和碳分子筛PLOT控的性能已达到世界先进水平,成为全国唯一集专业化科研开发与生产为一体的气相与液相色谱柱研究开发中心。
月旭材料科技(上海)有限公司 
UltimateTM“极限”系列色谱柱是美国Welch公司开发出的新一代HPLC液相色谱柱产品。月旭材料科技(上海)有限公司是美国Welch Materials, Inc.公司在上海张江高科技园区注册的全资子公司,经授权全面负责美国Welch公司产品在中国的业务。

统计

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产品与服务

气相色谱仪 
科晓GC1690系列高性能气相色谱仪,上海分析仪器总厂GC112A、GC122、GC102AT,岛津14C系列,安捷伦6890N、6820...
高效液相色谱仪 
上海伍丰LC-100,美国赛尔泰MODEL500,岛津LC-10AT、HPLC-2010A/2010C型,安捷伦1200...
气相色谱仪配件 
色谱气源类,进样针,填充柱定制,N2000色谱工作站,岛津仪器配件,安捷伦仪器配件...
液相色谱仪配件 
保护柱,进样针,柱温箱,氘灯,N2000色谱工作站,岛津液相配件,安捷伦液相配件...
毛细管色谱柱 
兰化所SE-30、SE-54、PEG-20M等,CEC,SGE,安捷伦...
液相色谱柱 
UltimateTM,依利特Hypersil系列,岛津液相柱,安捷伦液相柱,迪马Diamonsil,Waters液相柱...
光谱仪器 
可见分光光度计,紫外分光光度计,原子吸收分光光度计,红外分光光度计...
天平仪器 
电子分析天平,机械天平...
电化学仪器 
酸度计,自动电位滴定仪...
水份测定仪 
卡式水份仪,红外水份仪...
药检仪器 
旋光仪,数字熔点仪,阿贝折射仪,薄层色谱扫描仪...
箱式仪器 
电热蒸馏水器,干燥箱,水浴锅...
其他仪器 
显微镜,粘度计,搅拌器...

日志

FA/FC系列电子分析天平大型促销活动

分类:特别促销活动HOT!

为答谢客户对我公司的一贯支持,我们特进行特惠酬宾活动,赶快行动吧!本次活动仅限于广东广西海南三省,将于20061215结束。

存货名称(cinvname) 规格型号(cinvstd) 参考售价(fsalecost) 优惠单价(itaxunitprice) 产地(cinvdefine1)
电子分析天平 FA1004N(100g/0.1mg) 7000.00 4900.00 上海天平
电子分析天平 FA1104N(110g/0.1mg) 7100.00 5000.00 上海天平
电子分析天平 FA2004N(200g/0.1mg) 7990.00 5600.00 上海天平
电子天平 FA2004B(0-200g/0.1mg) 7990.00 5600.00 上海天平
电子分析天平 FA2104N(210g/0.1mg) 8100.00 5700.00

上海天平

 

FA-N/FC 电子分析天平
型号:FA2004B型
适用范围
FA/FC系列电子分析天平是集精确、稳定、多功能与自动化于一体的最先进电子天平,可以满足所有实验室质量分析要求。该天平采用高性能MCS-51单片微处理机控制,以确保天平称量结果高精确度,并具有标准的信号输出口,可直接连接打印机、计算机等设备来扩展天平的使用,使您的称量分析更加现代化,工作更轻松。
产品介绍

功能:

去皮重
累计称量
故障报警
悬挂称量
自动校正
量程转换
积分时间可调
灵敏度可调
称量单位转换(克、克拉、盎司)
计数功能
打印功能
RS232C,
标准输出接口

FA系列电子分析天平

型号

FA1004N

FA1104N

FA1604N

FA2004N

FA2004B

FA2104N

FA2104SN

称量范围

0100g

0110g

0160g

0200g

0200g

0210g

0~60/60~210g

读数精度

0.1mg

称盘尺寸

Φ80mm

输出接口

RS232C

外型尺寸

324mm×217mm×335mm

净重

7kg

电源

220V/50Hz 110V/60Hz


FC
系列电子天平

型号

FC204

FC104

称量范围

0200g

0~110g

读数精度

0.1mg

称盘尺寸

80mm×80mm

输出接口

RS232C

外型尺寸

210mm×430mm×310mm

净重

10kg

电源

220V/50Hz

 

其它说明
使用注意事项:
1、使用环境要求清洁、无尘、无强气流、无震动 , 环境温度 20 ℃±5 ℃湿度 50% 一 80%, 工作电压 220V ±20V 。
2、天平应置于稳定、坚固的工作台上 , 周围无强磁场。
3、开机前先插上电源 , 调整水准器 , 按 "ON" 键 , 使仪器处于预热状态。
4、详细阅读使用说明书 , 熟悉面板的功能键。
5、称物前 , 先按 ( 去皮 ) 键 , 使仪器显示为全 " 0 ", 再按校准键 , 显示 "GAL-200 ", 将 200g的 随机硅码轻轻放在称盘上 , 显示 "please wait", 再显示 "200.00000g", 校准完毕 , 拿掉校准砝码 , 显示出现 "0.0000g", 如不回零 , 可再重复一次。
6、在称物体时 , 要将物体放在称盘中 , 要轻轻地拿 , 不要使物体冲击称盘 , 避免传感器受冲击力 , 影晌称量数值。
7、读数前必须关闭防尘罩的玻璃移门 , 保证称量的正确性。
8、严禁有腐蚀性的称物直接接触称盘及天平台板上。
9、使用完毕后 , 要清理仪器称盘 , 台板上的残留物 , 使仪器保持清洁。
10、按 "OFF" 键 , 关闭仪器 , 拔掉电源插座 , 套上防尘罩。

极限UltimateTM 色谱柱特别促销活动

分类:特别促销活动HOT!

极限UltimateTM 色谱柱:8.5折+送时尚MP3一个

UltimateTM 色谱柱具有最高的理论踏板数和非常低的背压,宽pH(pH=1.5~10.0)范围, 优良的批与批和柱与柱间的重现性, 对中性, 极性, 酸性和碱性化合物, 尤其是强碱性化合物,均有最好的峰形。其优异的色谱分离性能归因于:UltimateTM 极限系列色谱柱,是月旭公司选取B型超高纯全多孔球星硅胶(纯度>99.999%)为基质,采用公司独有的全新固定相键合技术和完全封尾技术,而开发并推向市场的新一代HPLC色谱柱产品。

与其它知名品牌进口原装柱的综合性能对比

色谱柱: 4.6 x 100 mm, 5 ?m
流动相: 80%甲醇/ 20%
        20mM 磷酸盐, pH 7.0
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 25℃
样品:
    1) 尿嘧啶
    2) 心得安
    3) 去甲替林
    4) 丙咪嗪
    5) 阿密曲替林
N为理论塔板数,Tf为拖尾因子
色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 ?m
流动相: 80% MeOH/20%
        20mM p磷酸盐, pH 7.0
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 25℃
样品:
    1) 尿嘧啶
    2) 心得安
    3) 去甲替林
    4) 丙咪嗪
    5) 阿密曲替林
 
与其它知名品牌进口原装柱的性能比较

 
与其它知名品牌进口原装柱的价格对比


UltimateTM“极限”系列色谱柱的特性
 
各型号色谱柱的基本物理特性

 
超纯全多孔球形硅胶
1、高达99.999%的纯度
色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 ?m
流动相: 45% 甲醇/ 55%
        20 mM 磷酸盐, pH 7.6
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 25℃
进样量: 1 ?l
样品:
    1) 4,4’-联吡啶
    2) 2,2’-联吡啶
    3) 1,2-二羟基萘

Al、Fe、Ti和Zr等各金属的含量均小于10ppm,4,4’-联吡啶不能与金属形成螯合物,作为参照;2,2’-联吡啶和1,2-二羟基萘对硅胶中痕量金属非常敏感,在pH= 7.6的条件下,用UltimateTM XB-C18极限柱对三种物质进行`拖尾现象严重。某些国外知名公司的第一代和第二代产品中所用的基质材料也是A型硅胶,目前,仍有许多在国外已遭淘汰的第一代和第二代产品在我国的市场上销售。

2、粒径分布均匀

       

3、孔径分布均匀

UltimateTM填料粒子,比表面积320 m2/g,对疏水性和极性化合物具有很强的保留能力。月旭公司进一步用一种特殊的重羟基化工艺统一处理原料硅胶,完全消除了一些导致柱效下降的微孔,同时形成一种惰性和均匀一致的表面。UltimateTM填料粒子的机械稳定性亦十分良好。

 
独特的固定相键合技术

在键合相合成前,月旭采用公司独有的方法对硅胶基质的表面进行重羟基化处理,消除了一些导致柱效下降的微孔,在硅胶上形成了一个非常光滑、酸性硅羟基位点少和分布均一的表面。UltimateTM系列中,包括XB-C18、AQ-C18、XB-C8、XB-Phenyl(苯基)和XB-CN(氰基)等,均是由一种全新的化学键合技术进行合成的。独特键合技术的使用保证了UltimateTM色谱柱具有优异的分离特性,使一些通常难于进行的分离变得可能。另外月旭公司的固定相完全封尾技术,使UltimateTM色谱柱具有极好的峰形和更长的使用寿命。

 
宽pH范围内的高柱效

UltimateTM XB-C18极限柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,对很宽范围内的许多有机化合物的常规目的分析所用的C18柱而言,我们的色谱柱无疑是一个绝佳的选择。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有最优的分离效率。中等pH值条件下,在其它C18柱中进行分析时,强碱性化合物通常会产生托尾现象,而在我们的C18相中进行分析时因其仍具有良好的对称峰形,因此呈现出最大的优势。高覆盖率和完全封尾的特点大大提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。  

 
较长的使用寿命
色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 ?m 
洗脱条件:
?流动相: 50% 1% TFA水溶液 pH 1.3/50% 甲醇
?流速: 3 mL/min, 柱温: 80°C,pH=1.3
?洗脱时间: 500 min (1000 倍色谱柱体积)
测试条件:
?流动相: 50% 1% TFA水溶液, pH 1.3/50% 甲醇
?流速: 1mL/min,
?温度: 80℃
?时间: 20 min      ?样品: 甲苯
洗脱与测试条件:
? 色谱柱: 4.6 x 75 mm, 5 ?m 
? 流动相: 30% water/70% MeOH, 20 mM
K3PO4/K2HPO4 缓冲溶液, pH 10; 
? 流速: 1.5 ml/min 
? 温度: 50℃
? 样品: 甲苯, 萘

分别在pH 1.3 和80℃ 和pH 10.0 和50℃的极端条件下对UltimateTM色谱柱和其它知名品牌的原装柱进行使用寿命的对比测试。 在pH 1.3 和 80℃条件下,30000柱体积的流动相的冲洗洗脱,UltimateTM XB-C18色谱柱的保留能力几乎没有改变,其表现好于进口顶级品牌的原装柱。在pH 10.0 和50℃条件下,UltimateTMXB-C18可以经受8000柱体积的洗脱,在硅胶基质的色谱柱中表现非常稳定,几乎可与Waters公司的聚合物柱Xterra媲美 。高覆盖率与全封尾技术,以及最优化并严格控制的装柱生产工序,使UltimateTM XB色谱柱在相对较低或较高的pH下仍保持高的柱效和使用寿命。

 
对各类化合物的分离均具有良好的峰形

 
对强碱性化合物具有最好的分离效果
色谱柱: 4.6 x 100 mm, 5 ?m 
流动相: 70% 20 mM 磷酸盐, 
        pH 7.6 30% 甲醇
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 25℃
进样量: 1 ?l
样品: 
1) 尿嘧啶   2) 苄胺   3) 苯酚

    强碱性物质如抗抑郁剂(tricyclic antidepressants or TCAs),在传统色谱柱中,由于传统的C18填料对TCAs发生不可逆吸附,导致峰形很差,测试值变得不可靠。UltimateTM 色谱柱由于其极高的表面覆盖率、最小的离子浓度和表面均匀的离子交换位点,对强碱性物质仍具有极好的峰形对称性和优良的色谱性能。
 
宽范围的反相色谱柱的选择性
    UltimateTM XB系列是一种高C18覆盖率和封尾的广泛键合相,包括目前最流行的XB-C18, XB-C8, XB-Phenyl(苯基)和XB-CN(氰基)键合相。可供选择的还有适度覆盖率的合成AQ-C18相, 最佳应用于高含水量的流动相而无“相塌陷”, 也可作为一般的C18相使用。所有这些相都是由单链有机硅烷来合成的,以确保优良的批与批之间的重现性和较快的传质速率。
色谱柱: 4.6 x 150 mm, 5 ?m
流动相: 78% 20 mM 磷酸盐, 
        pH 2.7/ 22%甲醇
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 40℃
样品: 1、 硫脲    2、 苄胺   3、 3-氨基喹啉
4、 2,3-二氮杂萘   5、 咖啡因
6、 4-乙基苯胺     7、 苯甲醇
 
优良的批与批和柱与柱间的重现性
    最优化的硅胶填料键合、封尾和装柱等工艺、严格的质量保证措施,确保UltimateTM色谱柱产品具有高品质的色谱分离性能和极佳的质量稳定性和可靠性,使UltimateTM 系列高效液相色谱柱产品在批与批之间和柱与柱之间有良好的重现性。
色谱柱: UltimateTM XB-C18, 
4.6 x 100 mm, 5 ?m 
流动相: 30%甲醇/ 70%水
流速: 1 ml/min
波长: 215 nm
温度: 25℃
进样量: 1 ?l
样品: 
1) 尿嘧啶  2) 茶碱  3) 咖啡因  4) 苯酚

色谱泵的保养

分类:用户园地

要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气,下面列出预防泵故障的几项措施:
  1)、用高质量试剂和HPLC级溶剂;
  2)、过滤流动相和溶剂;
  3)、脱气;
  4)、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液;
  5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;
  6)、定期更换垫圈;
  7)、需要时加润滑油;
  8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。
  处于良好操作状态的泵,应该能使色谱图上的基线平稳;保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。
  为了使故障发生后尽快排除,平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件,以及更换工具。

HPLC培训教程 IV.固定相和流动相

分类:用户园地

在色谱分析中,如何选择最佳的色谱条件以实现最理想分离,是色谱工作者的重要工作,也是用计算机实现HPLC分析方法建立和优化的任务之一。本章着重讨论填料基质、化学键合固定相和流动相的性质及其选择。
一、基质(担体)
  HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联  苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少传质,最终使柱效降低。
1.基质的种类
1)硅胶
  硅胶是HPLC填料中最普遍的基质。除具有高强度外,还提供一个表面,可以通过成熟的硅烷化技术键合上各种配基,制成反相、离子交换、疏水作用、亲水作用或分子排阻色谱用填料。硅胶基质填料适用于广泛的极性和非极性溶剂。缺点是在碱性水溶性流动相中不稳定。通常,硅胶基质的填料推荐的常规分析pH范围为2~8。
硅胶的主要性能参数有:
  ①平均粒度及其分布。
  ②平均孔径及其分布。与比表面积成反比。
  ③比表面积。在液固吸附色谱法中,硅胶的比表面积越大,溶质的k值越大。
  ④含碳量及表面覆盖度(率)。在反相色谱法中,含碳量越大,溶质的k值越大。
  ⑤含水量及表面活性。在液固吸附色谱法中,硅胶的含水量越小,其表面硅醇基的活性越强,对溶质的吸附作用越大。
  ⑥端基封尾。在反相色谱法中,主要影响碱性化合物的峰形。
  ⑦几何形状。硅胶可分为无定形全多孔硅胶和球形全多孔硅胶,前者价格较便宜,缺点是涡流扩散项及柱渗透性差;后者无此缺点。
  ⑧硅胶纯度。对称柱填料使用高纯度硅胶,柱效高,寿命长,碱性成份不拖尾。
  2)氧化铝
  具有与硅胶相同的良好物理性质,也能耐较大的pH范围。它也是刚性的,不会在溶剂中收缩或膨胀。但与硅胶不同的是,氧化铝键合相在水性流动相中不稳定。不过现在已经出现了在水相中稳定的氧化铝键合相,并显示出优秀的pH稳定性。

3)聚合物
  以高交联度的苯乙烯-二乙烯苯或聚甲基丙烯酸酯为基质的填料是用于普通压力下的HPLC,它们的压力限度比无机填料低。苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性强。使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用NaOH或强碱来清洗色谱柱。甲基丙烯酸酯基质本质上比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强,但它可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。这种基质不如苯乙烯-二乙烯苯那样耐酸碱,但也可以承受在pH13下反复冲洗。
  所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。用于HPLC的高交联度聚合物填料,其膨胀和收缩要有限制。溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中,因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢,所以造成小分子在这种基质中柱效低。对于大分子像蛋白质或合成的高聚物,聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。因此,聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
  2.基质的选择
  硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析,尤其是小分子量的被分析物,聚合物填料用于大分子量的被分析物质,主要用来制成分子排阻和离子交换柱。
 硅胶 氧化铝 苯乙烯-二乙烯苯 甲基丙烯酸酯
耐有机溶剂 +++ +++ ++ ++
适用pH范围 + ++ +++ ++
抗膨胀/收缩 +++ +++ + +
耐压 +++ +++ ++ +
表面化学性质 +++ + ++ +++
效能 +++ ++ + +
注:+++好  ++一般  +差
  二、化学键合固定相
  将有机官能团通过化学反应共价键合到硅胶表面的游离羟基上而形成的固定相称为化学键合相。这类固定相的突出特点是耐溶剂冲洗,并且可以通过改变键合相有机官能团的类型来改变分离的选择性。
  1.键合相的性质
  目前,化学键合相广泛采用微粒多孔硅胶为基体,用烷烃二甲基氯硅烷或烷氧基硅烷与硅胶表面的游离硅醇基反应,形成Si-O-Si-C键形的单分子膜而制得。硅胶表面的硅醇基密度约为5个/nm2,由于空间位阻效应(不可能将较大的有机官能团键合到全部硅醇基上)和其它因素的影响,使得大约有40~50%的硅醇基未反应。
  残余的硅醇基对键合相的性能有很大影响,特别是对非极性键合相,它可以减小键合相表面的疏水性,对极性溶质(特别是碱性化合物)产生次级化学吸附,从而使保留机制复杂化(使溶质在两相间的平衡速度减慢,降低了键合相填料的稳定性。结果使碱性组分的峰形拖尾)。为尽量减少残余硅醇基,一般在键合反应后,要用三甲基氯硅烷(TMCS)等进行钝化处理,称封端(或称封尾、封顶,end-capping),以提高键合相的稳定性。另一方面,也有些ODS填料是不封尾的,以使其与水系流动相有更好的“湿润”性能。

由于不同生产厂家所用的硅胶、硅烷化试剂和反应条件不同,因此具有相同键合基团的键合相,其表面有机官能团的键合量往往差别很大,使其产品性能有很大的不同。键合相的键合量常用含碳量(C%)来表示,也可以用覆盖度来表示。所谓覆盖度是指参与反应的硅醇基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例。
  pH值对以硅胶为基质的键合相的稳定性有很大的影响,一般来说,硅胶键合相应在pH=2~8的介质中使用。
2.键合相的种类
  化学键合相按键合官能团的极性分为极性和非极性键合相两种。
  常用的极性键合相主要有氰基(-CN)、氨基(-NH2)和二醇基(DIOL)键合相。极性键合相常用作正相色谱,混合物在极性键合相上的分离主要是基于极性键合基团与溶质分子间的氢键作用,极性强的组分保留值较大。极性键合相有时也可作反相色谱的固定相。
  常用的非极性键合相主要有各种烷基(C1~C18)和苯基、苯甲基等,以C18应用最广。非极性键合相的烷基链长对样品容量、溶质的保留值和分离选择性都有影响,一般来说,样品容量随烷基链长增加而增大,且长链烷基可使溶质的保留值增大,并常常可改善分离的选择性;但短链烷基键合相具有较高的覆盖度,分离极性化合物时可得到对称性较好的色谱峰。苯基键合相与短链烷基键合相的性质相似。
  另外C18柱稳定性较高,这是由于长的烷基链保护了硅胶基质的缘故,但C18基团空间体积较大,使有效孔径变小,分离大分子化合物时柱效较低。
  3.固定相的选择
  分离中等极性和极性较强的化合物可选择极性键合相。氰基键合相对双键异构体或含双键数不等的环状化合物的分离有较好的选择性。氨基键合相具有较强的氢键结合能力,对某些多官能团化合物如甾体、强心甙等有较好的分离能力;氨基键合相上的氨基能与糖类分子中的羟基产生选择性相互作用,故被广泛用于糖类的分析,但它不能用于分离羰基化合物,如甾酮、还原糖等,因为它们之间会发生反应生成Schiff 碱。二醇基键合相适用于分离有机酸、甾体和蛋白质。
  分离非极性和极性较弱的化合物可选择非极性键合相。利用特殊的反相色谱技术,例如反相离子抑制技术和反相离子对色谱法等,非极性键合相也可用于分离离子型或可离子化的化合物。ODS(octadecyl silane)是应用最为广泛的非极性键合相,它对各种类型的化合物都有很强的适应能力。短链烷基键合相能用于极性化合物的分离,而苯基键合相适用于分离芳香化合物。

另外,美国药典对色谱法规定较严,它规定了柱的长度,填料的种类和粒度,填料分类也较详细,这样使色谱图易于重现;而中国药典仅规定填料种类,未规定柱的长度和粒度,这使检验人员难于重现实验,在某些情况下还浪费时间和试剂。
  三、流动相
  1.流动相的性质要求
  一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。
  选好填料(固定相)后,强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少,相应的容量因子k降低;而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加,相应的容量因子k升高。因此,k值是流动相组成的函数。塔板数N一般与流动相的粘度成反比。所以选择流动相时应考虑以下几个方面:
  ①流动相应不改变填料的任何性质。低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。碱性流动相不能用于硅胶柱系统。酸性流动相不能用于氧化铝、氧化镁等吸附剂的柱系统。
  ②纯度。色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
  ③必须与检测器匹配。使用UV检测器时,所用流动相在检测波长下应没有吸收,或吸收很小。当使用示差折光检测器时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。
  ④粘度要低(应<2cp)。高粘度溶剂会影响溶质的扩散、传质,降低柱效,还会使柱压降增加,使分离时间延长。最好选择沸点在100℃以下的流动相。
  ⑤对样品的溶解度要适宜。如果溶解度欠佳,样品会在柱头沉淀,不但影响了纯化分离,且会使柱子恶化。
  ⑥样品易于回收。应选用挥发性溶剂。
  2.流动相的选择
  在化学键合相色谱法中,溶剂的洗脱能力直接与它的极性相关。在正相色谱中,溶剂的强度随极性的增强而增加;在反相色谱中,溶剂的强度随极性的增强而减弱。
正相色谱的流动相通常采用烷烃加适量极性调整剂。
  反相色谱的流动相通常以水作基础溶剂,再加入一定量的能与水互溶的极性调整剂,如甲醇、乙腈、四氢呋喃等。极性调整剂的性质及其所占比例对溶质的保留值和分离选择性有显著影响。一般情况下,甲醇-水系统已能满足多数样品的分离要求,且流动相粘度小、价格低,是反相色谱最常用的流动相。但Snyder则推荐采用乙腈-水系统做初始实验,因为与甲醇相比,乙腈的溶剂强度较高且粘度较小,并可满足在紫外185~205nm处检测的要求,因此,综合来看,乙腈-水系统要优于甲醇-水系统。

除去流动相中的溶解氧将大大提高UV检测器的性能,也将改善在一些荧光检测应用中的灵敏度。常用的脱气方法有:加热煮沸、抽真空、超声、吹氦等。对混合溶剂,若采用抽气或煮沸法,则需要考虑低沸点溶剂挥发造成的组成变化。超声脱气比较好,10~20分钟的超声处理对许多有机溶剂或有机溶剂/水混合液的脱气是足够了(一般500ml溶液需超声20~30min方可),此法不影响溶剂组成。超声时应注意避免溶剂瓶与超声槽底部或壁接触,以免玻璃瓶破裂,容器内液面不要高出水面太多。
  离线(系统外)脱气法不能维持溶剂的脱气状态,在你停止脱气后,气体立即开始回到溶剂中。在1~4小时内,溶剂又将被环境气体所饱和。
  在线(系统内)脱气法无此缺点。最常用的在线脱气法为鼓泡,即在色谱操作前和进行时,将惰性气体喷入溶剂中。严格来说,此方法不能将溶剂脱气,它只是用一种低溶解度的惰性气体(通常是氦)将空气替换出来。此外还有在线脱气机。
  一般说来有机溶剂中的气体易脱除,而水溶液中的气体较顽固。在溶液中吹氦是相当有效的脱气方法,这种连续脱气法在电化学检测时经常使用。但氦气昂贵,难于普及。
  5.流动相的滤过
  所有溶剂使用前都必须经0.45&micro;m(或0.22&micro;m)滤过,以除去杂质微粒,色谱纯试剂也不例外(除非在标签上标明“已滤过”)。
  用滤膜过滤时,特别要注意分清有机相(脂溶性)滤膜和水相(水溶性)滤膜。有机相滤膜一般用于过滤有机溶剂,过滤水溶液时流速低或滤不动。水相滤膜只能用于过滤水溶液,严禁用于有机溶剂,否则滤膜会被溶解!溶有滤膜的溶剂不得用于HPLC。对于混合流动相,可在混合前分别滤过,如需混合后滤过,首选有机相滤膜。现在已有混合型滤膜出售。
  6.流动相的贮存
  流动相一般贮存于玻璃、聚四氟乙烯或不锈钢容器内,不能贮存在塑料容器中。因许多有机溶剂如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑剂,导致溶剂受污染。这种被污染的溶剂如用于HPLC系统,可能造成柱效降低。贮存容器一定要盖严,防止溶剂挥发引起组成变化,也防止氧和二氧化碳溶入流动相。
  磷酸盐、乙酸盐缓冲液很易长霉,应尽量新鲜配制使用,不要贮存。如确需贮存,可在冰箱内冷藏,并在3天内使用,用前应重新滤过。容器应定期清洗,特别是盛水、缓冲液和混合溶液的瓶子,以除去底部的杂质沉淀和可能生长的微生物。因甲醇有防腐作用,所以盛甲醇的瓶子无此现象。

7.卤代有机溶剂应特别注意的问题
  卤代溶剂可能含有微量的酸性杂质,能与HPLC系统中的不锈钢反应。卤代溶剂与水的混合物比较容易分解,不能存放太久。卤代溶剂(如CCl4、CHCl3等)与各种醚类(如乙醚、二异丙醚、四氢呋喃等)混合后,可能会反应生成一些对不锈钢有较大腐蚀性的产物,这种混合流动相应尽量不采用,或新鲜配制。此外,卤代溶剂(如CH2Cl2)与一些反应性有机溶剂(如乙腈)混合静置时,还会产生结晶。总之,卤代溶剂最好新鲜配制使用。如果是和干燥的饱和烷烃混合,则不会产生类似问题。
8.HPLC用水
  HPLC应用中要求超纯水,如检测器基线的校正和反相柱的洗脱。
  进行HPLC、GC、电泳和荧光分析,或在涉及组织培养时,没有有机物污染是非常重要的。测高锰酸钾颜色保留时间的定性方法反应慢,对很低水平的有机物(对HPLC可能还是太高了)不够灵敏,特别是不能定量。总有机碳(TOC)分析仪(把有机物氧化成CO2,测游离的CO2)常用于I类(NCCLS)水中低浓度有机物的测定。
I类水标准:
 NCCLS ASTM
电阻率,MΩ?cm,25℃,最小 10.0 18.0
硅酸盐,mg/L,最大 0.05 0.003
微粒,&micro;m滤器 0.22 0.2
微生物,CFU/ml 10 分三档
  美国药典24版(2000年)要求TOC<0.5 mg/L(用标准蔗糖溶液1.19 mg/L),电导率在室温pH 6时≤2.4 &micro;S/cm(即≥0.42 MΩ?cm)。HPLC级水增加吸收特性:在1cm池中,用超纯水作空白,在190nm、200nm和250~400nm的吸收度分别不得过0.01、0.01和0.05。增加不挥发物,≤3ppm(中国药典纯水≤10ppm)。

红外谱图的解析经验

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首先应该对各官能团的特征吸收熟记于心,
因为官能团特征吸收是解析谱图的基础。
对一张已经拿到手的红外谱图:
(1)首先依据谱图推出化合物碳架类型:根据分子式计算不饱和度,公式:
不饱和度=F+1+(T-O)/2 其中:
F:化合价为4价的原子个数(主要是C原子),
T:化合价为3价的原子个数(主要是N原子),
O:化合价为1价的原子个数(主要是H原子),
我以前本科上谱学导论时老师给过公式,但字母都被我改了:F、T、O分别是英文4,3
1的首字母,这样我记起来就不会忘了 :)。
举个例子:比如苯:C6H6,不饱和度=6+1+(0-6)/2=4,3个双键加一个环,正好
为4个不饱和度;
(2)分析3300~2800cm^-1区域C-H伸缩振动吸收;以3000 cm^-1为界:高于3000cm^-1为不
饱和碳C-H伸缩振动吸收,有可能为烯, 炔, 芳香化合物,而低于3000cm^-1一般为饱
和C-H伸缩振动吸收;
(3)若在稍高于3000cm^-1有吸收,则应在 2250~1450cm^-1频区,分析不饱和碳碳键的伸
缩振动吸收特征峰,其中:
炔 2200~2100 cm^-1
烯 1680~1640 cm^-1
芳环 1600,1580,1500,1450 cm^-1
若已确定为烯或芳香化合物,则应进一步解析指纹区,即1000~650cm^-1的频区 ,以
确定取代基个数和位置(顺反,邻、间、对);
(4)碳骨架类型确定后,再依据其他官能团,如 C=O, O-H, C-N 等特征吸收来判定化合物
的官能团;
(5)解析时应注意把描述各官能团的相关峰联系起来,以准确判定官能团的存在,如2820
,2720和1750~1700cm^-1的三个峰,说明醛基的存在。
解析的过程基本就是这样吧,至于制样以及红外谱图软件的使用,一般的有机实验书上都
有比较详细的介绍的,这里就不唠叨了。
这是一个令人头疼的问题,有事没事就记一两个吧:
1.烷烃:C-H伸缩振动(3000-2850cm^-1)
C-H弯曲振动(1465-1340cm^-1)
一般饱和烃C-H伸缩均在3000cm^-1以下,接近3000cm^-1的频率吸收。
2.烯烃:烯烃C-H伸缩(3100~3010cm^-1)

C=C伸缩(1675~1640 cm^-1)
烯烃C-H面外弯曲振动(1000~675cm^1)。
3.炔烃:伸缩振动(2250~2100cm^-1)
炔烃C-H伸缩振动(3300cm^-1附近)。
4.芳烃:3100~3000cm^-1 芳环上C-H伸缩振动
1600~1450cm^-1 C=C 骨架振动
880~680cm^-1 C-H面外弯曲振动
芳香化合物重要特征:一般在1600,1580,1500和1450cm^-1可能出现强度不等的4个峰。
880~680cm^-1,C-H面外弯曲振动吸收,依苯环上取代基个数和位置不同而发生变化 ,在
芳香化合物红外谱图分析中,常常用此频区的吸收判别异构体。
5.醇和酚:主要特征吸收是O-H和C-O的伸缩振动吸收,
O-H 自由羟基O-H的伸缩振动:3650~3600cm^-1,为尖锐的吸收峰,
分子间氢键O-H伸缩振动:3500~3200cm^-1,为宽的吸收峰;
C-O 伸缩振动: 1300~1000cm^-1
O-H 面外弯曲: 769-659cm^-1
6. 醚: 特征吸收: 1300~1000cm^-1 的伸缩振动,
脂肪醚: 1150~1060cm^-1 一个强的吸收峰
芳香醚:两个C-O伸缩振动吸收: 1270~1230cm^-1(为Ar-O伸缩)
1050~1000cm^-1(为R-O伸缩)
7.醛和酮: 醛的主要特征吸收: 1750~1700cm^-1(C=O伸缩)
2820,2720cm^-1(醛基C-H伸缩)
脂肪酮: 1715cm^-1,强的C=O伸缩振动吸收,如果羰基与烯键或芳环共轭会使吸收频率降低
8.羧酸:羧酸二聚体: 3300~2500cm^-1 宽,强的O-H伸缩吸收
1720~1706cm^-1 C=O 吸收
1320~1210cm^-1 C-O伸缩
920cm^-1 成键的O-H键的面外弯曲振动
9.酯: 饱和脂肪族酯(除甲酸酯外)的C=O 吸收谱带: 1750~1735cm^-1区域
饱和酯C-C(=O)-O谱带:1210~1163cm^-1 区域 ,为强吸收
10.胺:3500~3100 cm^-1, N-H 伸缩振动吸收
1350~1000 cm^-1, C-N 伸缩振动吸收
N-H变形振动相当于CH2的剪式振动方式, 其吸收带在:
1640~1560cm^-1, 面外弯曲振动在900~650cm^-1.
11.腈:腈类的光谱特征:三键伸缩振动区域,有弱到中等的吸收
脂肪族腈 2260-2240cm^-1
芳香族腈 2240-2222cm^-1

12.酰胺: 3500-3100cm^-1 N-H伸缩振动
1680-1630cm^-1 C=O 伸缩振动
1655-1590cm^-1 N-H弯曲振动
1420-1400cm^-1 C-N伸缩
13.有机卤化物: C-X 伸缩 脂肪族 C-F 1400-730 cm^-1
C-Cl 850-550 cm^-1
C-Br 690-515 cm^-1
C-I 600-500 cm^-1

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